HE染色實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)

　　HE染色（Hematoxylin and Eosin staining）是最常見(jiàn)的組織切片染色技術(shù)之一，用于在顯微鏡下觀察和分析組織或細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和形態(tài)。那么HE染色實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)都有什么呢？讓我們一起來(lái)看看吧！

　　1.組織固定

　　組織樣本必須被充分固定，以防止處理過(guò)程中組織細(xì)胞的破壞。用10％緩沖福爾馬林（Formalin）進(jìn)行固定通常是一個(gè)比較好的選擇。

　　2.切片制備

　　對(duì)于組織樣本的切片厚度和形狀需謹(jǐn)慎考慮。切片應(yīng)該是均勻的，并且不能太薄或太厚。一般來(lái)說(shuō)，4-5微米是一個(gè)常見(jiàn)的厚度。

　　3.pH值調(diào)節(jié)

　　染色時(shí)調(diào)節(jié)pH值很重要。組織切片在染色前必須在適當(dāng)?shù)木彌_液中浸泡，在染色期間pH值應(yīng)始終穩(wěn)定.如果組織塊在福爾馬林中固定時(shí)間長(zhǎng)，組織酸化而影響細(xì)胞核著色。因此，要在自來(lái)水中沖洗時(shí)間長(zhǎng)一些或在飽和碳酸li水溶液中處理10-30min，這樣可以使細(xì)胞核著色較深。染伊紅時(shí)胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。

　　4.控制分色時(shí)間

　　切片染蘇木精后，分色這一步是關(guān)鍵，應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行，一般以細(xì)胞核染色清楚（晰）而細(xì)胞質(zhì)基本無(wú)色為佳。如果過(guò)分延長(zhǎng)分色時(shí)間將導(dǎo)致染色太淺，應(yīng)重新染色后再行分色。

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